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谷物淀粉含量的測定(旋光法)

關(guān)鍵詞: 谷物 淀粉含量 旋光法來源: 互聯(lián)網(wǎng)

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淀粉(starch)是植物 的主要貯藏物質(zhì),大部分貯存于種子、塊根和塊莖中。淀粉不僅是重要的營養(yǎng)物質(zhì),并且在工業(yè)上的應(yīng)用也很廣泛。測定谷物中淀粉的含量對(duì)于鑒定農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)和改進(jìn)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)技術(shù)有很大的意義。 一、原理: 酸性氯化鈣溶液與磨細(xì)的含淀粉樣品共煮,可使淀粉輕度水解。同時(shí)鈣離子與淀粉分子 上的羥基絡(luò)合,這就使得淀粉分子充分地分散到溶液中,成為淀粉溶液。淀粉分子具有不對(duì)稱碳原子,因而具有旋光性,可以利用旋光儀測定淀粉溶膠的旋光度(α),旋光度的大小與淀粉的濃度成正比,據(jù)此可以求出淀粉含量。溶提淀粉溶膠所用的酸性氯化鈣溶液的pH值必須保持2.30,密度須為1.30,加時(shí)間的長短也要控制在一定范圍。因?yàn)橹挥性谶@些條件下,各種不同來源的淀粉溶液的比旋度[α]才都是203°,恒定不變。樣品中其他旋光性物質(zhì)(如糖分)須預(yù)先除去。 二、材料、儀器設(shè)備 及試劑: (一)材料:面粉或其他風(fēng)干樣品 (二)儀器設(shè)備:1. 植物樣品粉碎機(jī);2. 離心機(jī);3.分析天平;4. 粗天平;5. 旋光儀及附件;6. 三角瓶;7. 分樣篩(100目);8. 布氏漏斗、抽濾瓶及真空泵;9. 離心管;10. 小電爐。 (三)試劑: 三、實(shí)驗(yàn)步驟: 1. 樣品準(zhǔn)備: (1)稱取樣品:將樣品風(fēng)干、研磨、通過100目篩,精確稱取約2.5g樣品細(xì)粉(要求含淀粉約2g,請(qǐng)參考附注估計(jì)),置于離心管內(nèi)。 (2)脫脂:加乙醚數(shù)ml到離心管內(nèi),用細(xì)玻棒充分?jǐn)嚢?,然后離心。傾出上清液并收集以備回收乙醚。重復(fù)脫脂數(shù)次,以去除大部分油脂、色素等(因油脂的的存在會(huì)使以后淀粉溶液的過濾困難)。大多數(shù)谷物樣品含脂肪較少,可免去這個(gè)脫脂手續(xù)。 (3)抑制酶活性:加含有氯化高汞的乙醇溶液10ml到離心管內(nèi),充分?jǐn)嚢?,然后離心,傾去上清液,得到殘余物。 (4)脫糖:加80%乙醇10ml到離心管中,充分?jǐn)嚢枰韵礈鞖堄辔铮看味加猛徊0簦?,離心,傾去下清液。重復(fù)洗滌數(shù)次以去除可溶性糖分。 2. 溶提淀粉: (1)加醋酸-氯化鈣:先用醋酸氯化鈣溶液約10ml加到離心管中,攪拌后全部傾入250ml三角瓶內(nèi),再用醋酸氯化鈣溶液50ml分?jǐn)?shù)次洗滌離心管,洗滌液并入三角瓶內(nèi),攪拌玻棒也轉(zhuǎn)移到三角瓶內(nèi)。 (2)煮沸溶解:先用蠟筆標(biāo)記液面高度,直接置于加有石棉網(wǎng)的小電爐上,在4min~5min內(nèi)迅速煮沸,保持沸騰15min~17min,立即將三角瓶取下,置流水中冷卻。煮沸過程中要時(shí)加攪拌,勿令燒焦;要調(diào)節(jié)溫度,勿使泡沫涌出瓶外;常用玻璃將瓶側(cè)的細(xì)粒擦下;并加水保持液面高度。 3. 沉淀雜質(zhì)和定容: (1)加沉淀劑:將三角瓶內(nèi)的水解液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶,用醋酸氯化鈣溶液充分洗滌三角瓶瓶,并入容量內(nèi),加30%ZnSO41ml混合后,再加15%K4Fe(CN)61ml,用水稀釋至接近刻度時(shí),加95%乙醇一滴以破壞泡沫,然后稀釋到刻度,充分混合,靜置,以使蛋白充分沉淀。 (2)濾清:用布氏漏斗(加一層濾紙)吸氣過濾。先傾清溶液約10ml于此濾紙上,使其完全濕潤,讓溶液流干,棄去濾液,再傾清溶液進(jìn)行過濾,用干燥的容器接受此濾液,收集約50ml,即可供測定之用。 4. 測定旋光度:用旋光測定管裝滿濾液,小心地按照旋光儀使用說明,進(jìn)行旋光度的測定。淀粉(%)=α×N×100/{

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