一、氨基甲酸酯類農(nóng)藥的概述

氨基甲酸酯類農(nóng)藥是20世紀(jì)40年代發(fā)現(xiàn)并發(fā)展起來的具有殺蟲力強(qiáng)、作用迅速和對人毒性較低等高效、低毒、低殘留特點的農(nóng)藥,可分為N-烷基化合物(用做殺蟲劑)和N-芳香基化合物(用做除草劑)2類,其種類主要有甲萘威、呋喃丹、滴滅威和殘殺威等。該類農(nóng)藥一般為白色結(jié)晶粉末,難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,遇堿即可分解,受光線和溫度等作用可降解。因氨基甲酸酯類農(nóng)藥半衰期短,故對食品污染較輕。氨基甲酸酯類農(nóng)藥進(jìn)入人體后,可抑制膽堿酯酶的活性,出現(xiàn)中毒現(xiàn)象,具體表現(xiàn)為流涎、流淚、顫動、瞳孔縮小等癥狀,在低劑量輕度中毒時,可見一時性的麻醉作用,大劑量中毒時可表現(xiàn)深度麻痹,并有嚴(yán)重的呼吸困難。

二、氨基甲酸酯類農(nóng)藥的分類

氨基甲酸酯類用作農(nóng)藥的殺蟲劑、除草劑、殺菌劑等,也用作滅蚊藥,滅藥該類農(nóng)藥分為五大類:①萘基氨基甲酸酯類,如西維因;②苯基氨基甲酸酯類,如葉蟬散;③氨基甲酸酯類,如涕滅威;④雜環(huán)甲基氨基甲酸酯類,如呋喃丹;⑤雜環(huán)二甲基氨基甲酸酯類,如異索威。除少數(shù)品種如呋丹等毒性較高外,大多數(shù)屬中、低毒性。中毒表現(xiàn)與有機(jī)磷農(nóng)藥中毒類似,易混淆;阿托品是其特效解毒藥;禁用肟類膽堿酯酶復(fù)能劑。

氨基甲酸酯類農(nóng)藥主要在植物性食品中殘留,通常為氨基甲酸酯類殺蟲殘留,但一般均不超過國家標(biāo)準(zhǔn),氨基甲酸酯類農(nóng)藥在體內(nèi)不蓄積,動物食品不易檢出。常采用氣相色譜法進(jìn)行測定。

三、大米中氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留量的測定

1、儀器試劑

1)儀器

①氣相色譜儀:附有FTD(火焰熱離子檢測器)。

②電動振蕩器。

③組織搗碎機(jī)。

④糧食粉碎機(jī):帶20目篩。

⑤恒溫水浴鍋。

⑥減壓濃縮裝置。

⑦分液漏斗(250mL、500mL);量筒(50mL、100mL);具塞錐形瓶(250mL;抽濾瓶(250mL);布氏漏斗。

2)試劑

①無水硫酸鈉:于450℃焙烤4h備用。

②丙酮:重蒸。

③無水甲醇:重蒸。

④二氯甲烷:重蒸。

⑤石油醚:沸程30～60℃,重蒸。

⑥農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品,速滅威,純度≥99%;異丙威,純度≥99%;殘殺威,純度≥99%;克百威,純度≥29%;抗蚜威,純度≥99%;甲萘威,純度≥99%。

⑦氯化鈉溶液(50g/L):稱取25g氯化鈉,用水溶解并稀釋至500mL。

⑧甲醇-氯化鈉溶液:取無水甲醇及50g/L氯化鈉溶液等體積混合。

2、工作過程

1)氨基甲酸酯殺蟲劑標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分準(zhǔn)確些取速滅威、異丙威、克百威及甲萘威等各種標(biāo)準(zhǔn)液,用丙酮配制成1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。使用時用丙酮稀釋配制成單一品種的標(biāo)準(zhǔn)使用液(5μg/mL)和混合標(biāo)準(zhǔn)工作液(每個品種濃度為2～10μg/mL)。

2)試程的制備

取糧食經(jīng)糧食粉碎機(jī)粉碎,過20目篩制成糧食試樣。

3)提取

稱取約40g糧食試樣,精確至0.001g,置于250mL具寒形瓶中,加入20一40g無水硫酸鈉(視試樣的水分而定),100mL無水甲醇。塞緊,搖勻,于電動振離器上振蕩30min,然后經(jīng)快速濾紙過濾于量簡中,收集50mL濾液,轉(zhuǎn)入250mL分液漏斗中,用50g/L氯化鈉溶液洗滌量筒,并入分液漏斗中。

4)凈化

于盛有試樣提取液的250mL分液斗中加入50mL石油,振蕩1min,靜置分層后將下層(甲醇-氯化鈉溶液)放人第二個250mL分液漏斗中,加25mL甲醇-氯化鈉溶液于石油醚層中,振搖30s,靜置分層后,將下層并入甲醇-氯化鈉溶液中。

5)濃縮

于盛有試樣凈化液的分液漏斗中,用二氯甲烷(50mL、25mL、25mL)依次提取三次,每次振搖1min、靜置分層后將二氯甲烷層經(jīng)鋪有無水硫酸鈉(玻璃棉支撐)的漏斗(用二氯甲烷預(yù)洗過)過濾于250mL蒸瓶中,用少量二甲烷洗滌漏斗,并入蒸餾瓶中,將蒸餾瓶接上減壓濃縮裝置,于50℃水浴上減壓濃縮至1mL左右,取下蒸餾瓶,將殘余物轉(zhuǎn)入10mL刻度離心管中,用二氯甲烷反復(fù)洗滌餾瓶并入離心管中。然后吹氫氣除盡二氯甲烷,用丙酮溶解殘渣并定容至2.0mL,供氣相色譜分析用。

6)色譜參考條件

①色譜柱

a. 玻璃柱? 3.2mm(id)×2.1m,填裝涂有2%OV-101+6%OV-210混合固定液的Chromosorb W(HP)80～100目的載體。

b. 玻璃柱3.2mm(id)X1.5m,填裝涂有1.5%OV-17+1.95%OV210混合固定液的ChromosorbW(AW-DMCS)80～100目的載體。

②氣體條件:氮氣65mL/min、氫氣3.2mL/min、空氣15mL/min。

③溫度:柱溫190℃、進(jìn)樣口或檢測室溫度240℃。

7)測定

取前步驟中的試樣波及標(biāo)準(zhǔn)樣液各1μL,注入氣相色譜儀中,做色譜分析。根據(jù)組分在兩根色譜柱上的出峰時間與標(biāo)準(zhǔn)組分比較定性;用外標(biāo)法與標(biāo)準(zhǔn)組分比較定量。

3、圖示過程

4、結(jié)果處理

按下式計算:

式中? ? X_i——試樣中組分i的含量,mg/kg;

? ? ? ? ? ?E_i——標(biāo)準(zhǔn)試樣中組分i的含量,ng;

? ? ? ? ? ?A_i——試樣中組分i的峰面積或峰高;

? ? ? ? ? ?A_E——標(biāo)準(zhǔn)試樣中組分i的峰面積或峰高;

? ? ? ? ? ?m——試樣質(zhì)量,g;

? ? ? ? ? ?2000——進(jìn)樣液的定容體積,2.0mL;

? ? ? ? ? ?1000——換算單位。

5、注意事項

(1)測定原理? ? 含氮有機(jī)化合物被色譜柱分離后在加熱的堿金屬片的表面產(chǎn)生熱分解,形成氰自由基(?CN),并且從被加熱的堿金屬表面放出的原子狀態(tài)的堿金屬(Rb)接受電子變成CN^-,再與氫原子結(jié)合。放出電子的堿金屬變成正離子,由收集極收集,并作為信號電流而被測定,電流信號的大小與含氮化合的含量成正比,以峰面積或峰高比較定量。

(2)樣品預(yù)處理? ? 糧食經(jīng)糧食粉碎機(jī)粉碎,過20目篩制成糧食試樣:稱取約04g糧食試樣,精確至0.001g,置于250mL具塞錐形瓶中,加入20～40g無水硫酸鈉(視試樣的水分而定),100mL無水甲醇。塞緊,搖勻,于電動振蕩器上振蕩30min。然后經(jīng)快速濾紙過于量筒中,收集50mL濾液,轉(zhuǎn)入250mL分液漏斗中,用50g/L氯化鈉溶液洗滌量筒,并入分液漏斗中。

蔬菜樣品洗凈、晾干,去掉非食部分后剁碎或經(jīng)組織搗碎機(jī)搗碎制成蔬菜試樣:稱取20g蔬菜試樣,精確至0.001g,置于250mL具塞錐形瓶中,加入80mL無水甲醇,塞緊,于電動振蕩器上振蕩30min,然后經(jīng)鋪有快速濾紙的布氏漏斗抽濾于250mL抽濾瓶中,用50mL無水甲醇分次洗滌提取瓶及濾器。將濾液轉(zhuǎn)入500mL分液漏斗中,用100mL 50g/L氯化鈉水溶液分次洗滌濾器,并入分液漏斗中。

(3)樣品凈化? ? 糧食試樣:于盛有試樣提取液的250mL分液漏斗中加入50mL石油醚,振蕩1min,靜置分層后將下層(甲醇-氯化鈉溶液)放入第二個250mL分液漏斗中,加25mL甲醇-氯化鈉溶液于石油醚層中,振搖30s,靜置分層后,將下層并入甲醇-氯化鈉溶液中。

蔬菜試樣:于盛有試樣提取液的500mL分液漏斗中加入50mL石油醚,振蕩1min,靜置分層后將下層放入第二個500mL分液漏斗中,并加入50mL石油腿,振搖1min,靜置分是后將下層放入第三個500mL分液漏斗中,然后用25mL甲醇氯化鈉溶液并入第三分液漏斗中。