植物中硝酸鹽含量的測定注意事項
植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量的測定 一、試劑 1.硝氮-N 標準溶液 500μ g 氮/mL 精確稱取 0.7221g 烘干至恒質(zhì)量的 KNO3 溶于去離子水?中,定容至 200mL。 2.5%水楊酸-硫酸溶液 稱取 5g 水楊酸溶于 100mL 濃硫酸中(相對密度 1.84),攪拌溶解 后,貯于棕色瓶中,置冰箱保存一周有效。 3.8%氫氧化鈉溶液 稱取 20g 氫氧化鈉溶于 250mL 去離子水中。 二、實驗步驟 1.標準曲線的制作 (1)吸取 500μ g/mL NO3--N 標準溶液 1 mL、2mL、4mL、6mL、8mL、10mL、12mL 分 別放入 50 mL 容量瓶中,用去離子水定容至刻度,使之成 10μ g/mL、20μ g/mL、40μ g/mL、 60μ g/mL、80μ g/mL、100μ g/mL、120μ g/mL NO3--N 的系列標準溶液。 (2)吸取上述系列標準溶液 0.1 mL,分別放入刻度試管中,以 0.1 mL 去離子水代替標準溶 液做空白。 再分別加入 0.4 mL 5%水楊酸-硫酸溶液,搖勻,在室溫下放置 20min 后,再加 入 8% NaOH 溶液 9.5 mL,搖勻冷卻至室溫。 顯色液總體積為 10 mL。 (3)以空白做參比,在 410nm 波長下測定吸光度。 以 NO3--N 濃度做橫坐標(x),吸光度 為縱坐標(y),繪制標準曲線并計算出回歸方程。 2.樣品中硝酸鹽的 測定 (1)樣品液的制備 取一定量的植物材料剪碎混勻。 精確稱取 2~3g 3 份,分別放入 3 支刻 度試管中,加入 10 mL 去離子水,用玻璃珠封口,置入沸水浴中提取 30min 后取出,用自 來水冷卻,將提取液過濾到 25 mL 容量瓶中,并反復沖洗殘渣。 最后定容至刻度。 (2)樣品液的測定 吸取樣品液 0.1 mL 分別于 3 支刻度試管中,然后加入 5%水楊酸-硫酸 溶液 0.4 mL,混勻后置室溫下 20min,再慢慢加入 9.5 mL 8% NaOH 溶液,待冷卻至室溫后, 以空白做參比,在 410nm 波長下測其吸光度。 三、結(jié)果計算 樣品硝態(tài)氮含量(μ g/g)=x×VT÷(W×VS) 其中:x 為由回歸方程計算出的 NO3--N 濃度(μ g/mL);VT 為樣品定容體積(mL); W 為樣品質(zhì)量(g);VS 為測定取用的樣品提取液體積(mL)。
