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新聞中的新冠病毒核酸檢測(cè)方法到底是什么?

2020.2.19

  國(guó)務(wù)院聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制于2月17日召開新聞發(fā)布會(huì)。對(duì)于目前核酸檢測(cè)試劑檢測(cè)率不穩(wěn)定的問題,北大一院主任醫(yī)師王貴強(qiáng)解釋,核酸檢測(cè)本身的穩(wěn)定性是很好的。出現(xiàn)一些所謂檢不出的情況或者假陰性的情況,主要原因是任何檢測(cè)方法都有一個(gè)敏感性的問題。

  核酸檢測(cè),是指通過(guò)特殊的技術(shù)手段檢測(cè)臨床樣本中是否存在特定的病原體核酸,從而診斷患者的感染原因。此次新冠病毒是單鏈RNA病毒,根據(jù)《新冠病毒感染的肺炎診療方案(試行第五版)》(下文簡(jiǎn)稱診療方案)建議,針對(duì)疑似病例的確診,需要具備以下病原學(xué)證據(jù)之一者,即為確診病例:

  呼吸道標(biāo)本或血液標(biāo)本實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)新型冠狀病毒核酸陽(yáng)性;

  呼吸道標(biāo)本或血液標(biāo)本病毒基因測(cè)序,與已知的新型冠狀病毒高度同源;

  診療方案中提到了兩種檢測(cè)方式,實(shí)時(shí)熒光RT-PCR和基因測(cè)序。小編分別為大家做簡(jiǎn)要介紹:

  實(shí)時(shí)熒光RT-PCR,即實(shí)時(shí)熒光反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。它首先將提取的病毒基因組RNA,通過(guò)反轉(zhuǎn)錄變成互補(bǔ)DNA(cDNA)。然后再用病原體特異性的引物,以cDNA作為模板擴(kuò)增病原體核酸序列。因?yàn)閿U(kuò)增的過(guò)程中熒光染料能同步整合在產(chǎn)物上,所以研究者可以通過(guò)熒光信號(hào)的強(qiáng)弱,進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)。

  基因測(cè)序是目前使用最為廣泛的叫新一代測(cè)序(Next generation sequencing,NGS)(后面簡(jiǎn)稱NGS技術(shù))。我們比較熟悉的無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)(NIPT)使用的就是這項(xiàng)技術(shù)。在新冠病毒診斷中,NGS技術(shù)首先將病毒RNA制備成測(cè)序儀可以識(shí)別和分析的DNA文庫(kù),然后在測(cè)序儀上同時(shí)對(duì)數(shù)以百萬(wàn)計(jì)的核酸序列進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果經(jīng)生物信息學(xué)軟件處理,最后向我們展現(xiàn)出病毒相關(guān)序列信息。相比2003年SARS疫情花了2-3個(gè)月確定病原體,中國(guó)科學(xué)家在此次武漢疫情爆發(fā)短短2-3周內(nèi),就通過(guò)基因測(cè)序的方法鑒定出新型冠狀病毒,并成功繪制出其全基因組序列信息。這項(xiàng)技術(shù)的巨大成功,不僅使國(guó)內(nèi)診斷企業(yè)能快速研發(fā)用于新冠病毒診斷的實(shí)時(shí)熒光RT-PCR試劑盒,更向全世界展示了中國(guó)有先進(jìn)的技術(shù)能力幫助政府有效地掌握并控制疫情。即使到了疫情攻堅(jiān)戰(zhàn)的此刻,NGS技術(shù)仍然在解析第二代、第三代病毒變異情況和追蹤病毒起源及演化方面,扮演著不可替代的核心作用。

  央廣記者也曾到中部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院疾病預(yù)防控制科加強(qiáng)型生物安全二級(jí)負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室,實(shí)地探訪了新冠病毒核酸檢測(cè)流程。

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