凝血酶原時(shí)間（PT）測(cè)定實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法原理 待測(cè)血漿加入過(guò)量的含鈣組織凝血活酶，重新鈣化的血漿在組織因子存在時(shí)激活因子成為X成為Xa。后者使凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟?，凝血酶使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槟蝗苄岳w維蛋白，測(cè)定凝固所需時(shí)間、即為待測(cè)血漿凝血酶時(shí)間（PT）、PT測(cè)定是外源性系統(tǒng)理想和常用的篩選實(shí)驗(yàn)，也可作為外源性途徑凝血固定做定量試驗(yàn)，同時(shí)也可用于口服抗凝劑治療的監(jiān)控．標(biāo)本的來(lái)源與保存：
靜脈采血，置于含有1/10體積0.109mol/L枸櫞酸鈉抗凝液（1份抗凝液＋9份全血）的塑料管或硅化玻璃管中，輕輕顛倒混勻．3000rpm（或25O0）離心15分鐘，收集上層液（血漿，黃色），標(biāo)本在不同條件下保存時(shí)間如下：－80℃保存，不宜超過(guò)3O天，一20℃保存，不宜超過(guò)14天，2一8℃保存，不宜超過(guò)6小時(shí)，22-24℃保存，不宜超過(guò)2小時(shí)測(cè)定．
試劑、試劑盒 PT試劑
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 試劑重建：
于保存每瓶PT試劑加人2.0ml蒸餾水輕搖溶解．注意：試劑溶解后2－8℃可保存7天，室溫（15-25℃）可保存24小時(shí)，勿凍結(jié)．
2. 手工測(cè)定：
取待測(cè)血漿（參比血漿）0.1ml．37℃孵育2分鐘，加入37℃預(yù)溫凝血活酶0.2ml；混勻，立即啟動(dòng)秒表，記錄凝固時(shí)間，即為PT值．
3. 血凝儀測(cè)定：
請(qǐng)按儀器提供的參數(shù)操作
正常值：
1. 以時(shí)間表示11-15秒
2. 以PTD表示0.95-1.24
3. 以INR表示0.94-1.30
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注意事項(xiàng)
l. 采血必須使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器，貯血必須使用塑料試管或硅化玻璃管不宜使用普通玻璃管，避免凝血因子活化．
2. 采血時(shí)止血帶不可束縛過(guò)緊并不應(yīng)超過(guò)5分鐘，否則導(dǎo)致凝血及纖溶因子活化．
3. 血液應(yīng)立即加抗凝劑，血漿制備必須及時(shí)，血漿分離應(yīng)盡快去除血小板血漿分離后應(yīng)盡快測(cè)定。
4. 血漿預(yù)溫不宜超過(guò)10分鐘．
5. 凝血活酶預(yù)溫不宜超過(guò)30分鐘。
6. 用濁度法測(cè)定終點(diǎn)的自動(dòng)化凝血儀，溶血和較明顯的黃疸及脂血會(huì)影響測(cè)定結(jié)果，此時(shí)宜用手工法或電子機(jī)械或凝血儀測(cè)定．
7. 紅細(xì)胞比容超過(guò)55％或小于20％時(shí)，應(yīng)調(diào)整抗凝劑用量，抗凝劑體積（ml）＝0.00185×血液體積（ml）×（100－比容）.
8. 不宜使EDTA·Na2. 肝素，草酸鹽抗凝，應(yīng)使用0.109mol/L拘櫞酸鈉抗凝。
9. 一80℃及一20℃保存樣品，測(cè)定時(shí)37℃迅速融化，不可反復(fù)凍融．
10. 樣品采集避免溶血及組織液污染。
11. 建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考值范圍。
12. 手工操作時(shí)，凝血酶原時(shí)間的終點(diǎn)計(jì)算以出現(xiàn)混濁的初期凝固為準(zhǔn)．
13. 測(cè)定溫度36.5-38.5℃過(guò)低或過(guò)高溫度均使PT延長(zhǎng)．
