石墨爐原子吸收法測(cè)鉛
(一)食品中鉛含量限量
我國(guó)對(duì)食品中鉛的殘留量有嚴(yán)格的規(guī)定。蔬菜、水果、蛋類不超過O．2mg／kg，谷物及制品、鮮薯類不超過0．4mg／kg，肉類、魚蝦類不超過O．5mg／kg，豆類及制品不超過O.8mg／kg，薯類及其制品不超過1.Omg／kg。
食品中鉛含量的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法包括石墨爐原子吸收光譜法、火焰原子吸收光譜法、二硫腙比色法、氫化物原子熒光光譜法、單掃描極譜法等。
(二)二硫腙比色法
試樣經(jīng)消化后，在pH=8.5～9.0時(shí)，鉛離子與二硫腙生成紅色絡(luò)合物，溶于三氯甲烷。加入檸檬酸銨、氰化鉀和鹽酸羥胺等，防止鐵、銅、鋅等離子干擾，與標(biāo)準(zhǔn)系列使用液比較定量。本法摘自GB/T 5009.12—2003,適用于食品中鉛的測(cè)定，同樣也適用于食品包裝材料、食具、容器等浸泡液鉛含量的測(cè)定。本法最低檢出限量為0.25mg／kg。
1．試樣預(yù)處理
同石墨爐原子吸收光譜法。
2．試樣消化
(1)硝酸一硫酸法 適用于糧食、茶葉等以及其他含水分少的固體食品。稱取5.00g或10.00g粉碎試樣，置于250～500mL定氮瓶中，先加水少許使其濕潤(rùn)，加數(shù)粒玻璃珠、10-15mL硝酸，放置片刻，小火緩緩加熱，待作用緩和，放冷。沿瓶壁加入5mL一或lOmL硫酸，再加熱，至瓶中液體開始變成棕色時(shí)，不斷沿瓶壁滴加硝酸至有機(jī)質(zhì)分解完全。加大火力，至產(chǎn)生白煙，待瓶口白煙冒凈后，瓶?jī)?nèi)液體不再產(chǎn)生白煙，消化完全，溶液應(yīng)澄明無色或微帶黃色，放冷。(在操作過程中應(yīng)注意防止爆沸或爆炸)加20mL水煮沸，除去殘余的硝酸至產(chǎn)生白煙為止，如此處理兩次，放冷。將冷后的溶液移入50mL一或100mL容量瓶中，用水洗滌定氮瓶，洗液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混勻。定容后的溶液每10mL相當(dāng)于1g試樣，相當(dāng)于加入1mL硫酸。
取與消化試樣相同量的硝酸和硫酸，按照同一操作方法做試劑空白實(shí)驗(yàn)。
(2)灰化法 適用于糧食及其他含水分少的食品。稱取5.00g試樣，置于石英或瓷坩堝中，加熱至炭化，然后移入馬弗爐中，500℃灰化3h，放冷，取出坩堝，加少量硝酸(1+1)，潤(rùn)濕灰分，用小火蒸干，再移入馬弗爐中500℃燒lh，放冷。取出坩堝。加1ml硝酸(1+1)，加熱，使灰分溶解，移入50ml。容量瓶中，用少量水多次洗滌坩堝，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混勻備用。
3．測(cè)定
吸取10.OmL消化后的定容試液和同量的試劑空白液，分別置于125mL分液漏斗中，各加水至20mL。
吸取0、0．10mL、0．20mL、0．30mL、0．40mL、0．50mL鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)于0、1．0μg、2．0μg、3．Oμg、4．Oμg、5．Oμg鉛)，分別置于125mL分液漏斗中，各加硝酸(1+99)至20mL。于試樣消化液、試劑空白液和鉛標(biāo)準(zhǔn)液中各加2.OmL檸檬酸銨溶液(200g／L)、1.Oml。鹽酸羥胺溶液(200g／L)和2滴酚紅指示液，用氨水(1+1)調(diào)至紅色，再各加2.Oml氰化鉀溶液(100g／L)，混勻。各加5.OmL二硫腙使用液，劇烈振搖1min，靜止分層后，三氯甲烷層經(jīng)脫脂棉濾入1cm比色杯中，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn)于波長(zhǎng)510nm處測(cè)吸光度，各點(diǎn)減去零管吸收值后，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或計(jì)算一元回歸方程，試樣與曲線比較。
4．結(jié)果計(jì)算
X=(m1-m2)*1000/m3*V2/V1*1000
式中X——試樣中的鉛含量，mg／kg或mg／L；
m1——測(cè)定用試樣液中鉛的含量，μg；
m2——試劑空白液中鉛的含量μg；
m3——試樣質(zhì)量或體積，g或mL；
Vl——試樣處理液的總體積，mL；
V2一一測(cè)定用試樣處理液的總體積，mL。
5．試劑
①氨水(1+1)。
②鹽酸(1+1)：量取lOOmL鹽酸，加入100mL水中。
③酚紅指示劑(1g／L)：稱取0.10g酚紅，用少量多次乙醇溶解后移入100mL容量瓶中并定容至刻度。
④鹽酸羥胺溶液(200g／L)：稱取20.Og鹽酸羥胺，加水溶解至50mL，加2滴酚紅指示劑，加氨水(1+1),調(diào)pH值至8.5～9.O(溶液由黃變紅后，再多加2滴)，用二硫腙一三氯甲烷溶液提取至三氯甲烷層綠色不變?yōu)橹?，再用三氯甲烷洗兩次，棄去三氯甲烷層，水層加鹽酸(1+1)呈酸性，加水至100mL。
⑤檸檬酸銨溶液(200g/L)：稱取50.Og檸檬酸銨，溶于100mL水中，加2滴酚紅指示劑，加氨水(1+1)，調(diào)pH值至8.5～9.O，用二硫腙一三氯甲烷溶液提取數(shù)次，每次10～20mL，至三氯甲烷層綠色不變?yōu)橹?，棄去三氯甲烷層，再用三氯甲烷洗兩次，每?mL，棄去三氯甲烷層，加水稀釋至250mL。
⑥氰化鉀溶液(100g／L)：稱取10.Og氰化鉀，用水溶解后稀釋至100mL。氰化鉀是劇毒物質(zhì)，配制及使用時(shí)必須十分小心。
⑦三氯甲烷：應(yīng)不含氧化物。
⑧淀粉指示液：稱取0.5g可溶性淀粉，加5mL水?dāng)噭蚝?，慢慢倒?00mL沸水中，隨倒隨攪拌，煮沸，放冷備用，臨用時(shí)配制。
⑨硝酸(1+99)。
⑩二硫腙三氯甲烷溶液(0.5g／L)：保存在冰箱中，必要時(shí)需純化。
⑩二硫腙使用液：吸取1.OmL二硫腙溶液，加三氯甲烷至10mL混勻。用1cm比色杯，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長(zhǎng)5lOnm處測(cè)吸光度(A)，用下列公式算出配制100mL二硫腙使用液(70％透光率)所需二硫腙溶液的體積(V)。
⑥硝酸一硫酸混合酸(4+1)。
⑩鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取0.1598g硝酸鉛，加10mL硝酸(1+99)，全部溶解后，移入100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度。此溶液每毫升含鉛1.0mg。
⑩鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取1.0mL鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度。此溶液每毫升含鉛10.Oμg。
6．儀器
所用玻璃儀器均用硝酸(10％～20％)浸泡24h以上，用自來水反復(fù)沖洗，最后用去離子水沖洗干凈。
分光光度計(jì)。
7．注意事項(xiàng)
①儀器清洗對(duì)測(cè)定結(jié)果影響很大，本實(shí)驗(yàn)所用玻璃儀器應(yīng)使用10％～20%硝酸溶液浸泡過夜，用自來水反復(fù)沖洗，最后用去離子水沖洗干凈。
②純二硫腙(或其溶液)應(yīng)在低溫下(4～5℃)避光保存以免被氧化。
③用二硫腙法測(cè)定鉛，溶液的pH值對(duì)其影響較大，應(yīng)控制pH值在8.5～9.0范圍內(nèi)。
④二硫腙可與多種金屬離子作用生成絡(luò)合物。在pH一8.5～9.O時(shí)，加入氰化鉀可以掩蔽cu2+、Hg2+、Zn2+等離子的干擾；注意氰化鉀有劇毒。
⑤鹽酸羥胺作為還原劑，保護(hù)二硫腙不被高價(jià)金屬離子、過氧化物等氧化，加入鹽酸羥胺還可排除Fe3+的干擾。
⑥檸檬酸銨是一種在廣泛pH范圍內(nèi)有較強(qiáng)絡(luò)合能力的掩蔽劑，加入檸檬酸銨的主要作用是絡(luò)合鈣、鎂、鐵等離子，防止生成氫氧化物沉淀使鉛被吸附而受損失。
⑦所用試劑應(yīng)盡可能做提純處理。檸檬酸銨、二硫腙必須提純，其余試劑可根據(jù)試劑等級(jí)或通過空白實(shí)驗(yàn)，再?zèng)Q定是否需要提純
