熒光定量pcr標準曲線中的擴增效率太高怎么辦
1、調(diào)整下體系,不要自己配置反應(yīng)液,最好用商品的MIX,這樣各個組分都是最佳的配比。
2、三步法改為兩步法,退火延伸設(shè)置為一步,大部分的溫度為60度,這個只是建議,具體看你買的試劑的說明書,會有具體的說明。
3、很有可能有非特異性擴增,自己排查下反應(yīng)體系,根據(jù)溶解曲線是否單峰,擴增曲線CT值綜合分析。
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