UNE-EN ISO 20418-1:2019
紡織品某些動物毛發(fā)纖維的定性和定量蛋白質(zhì)組分析第1部分：使用 LC-ESI-MS 和蛋白質(zhì)還原進行肽檢測

Textiles - Qualitative and quantitative proteomic analysis of some animal hair fibres - Part 1: Peptide detection using LC-ESI-MS with protein reduction (ISO 20418-1:2018)

適用范圍: 本文件規(guī)定了一種定性和定量測試方法，通過顯微鏡初步篩選、蛋白質(zhì)提取、酶消化和使用配備電噴霧離子源的液相色譜-質(zhì)譜儀（LCI-ESI-MC）檢測特定肽段，測定紡織品中羊毛、羊絨、牦牛纖維及其混合物的含量。該方法適用于各加工階段（即從原材料到成衣）的紡織品樣品，前提是成分分布均勻。適用于含有羊毛、羊絨或牦牛纖維及其混合物的不同類型的紡織材料（如短纖維、毛條、紗線和織物）。該方法基于通過光學顯微鏡初步鑒定混合物中所有纖維的形態(tài)。然后使用硫脲/尿素/二硫蘇糖醇（DTT）溶液提取蛋白質(zhì)。對從纖維中提取的蛋白質(zhì)進行胰蛋白酶酶消化。通過LC-MS分析特定標記物并計算百分比組成。該方法適用于除羊毛、羊絨和牦牛以外的其他纖維樣品，通過將其結(jié)果與ISO 1833系列和/或ISO 17751系列的結(jié)果相結(jié)合。本文件不適用于存在相同動物物種纖維的情況（例如羊絨和馬海毛的混合物）；在這種情況下，可以使用顯微鏡分析（例如ISO 17751系列）進行定量分析。

術(shù)語	描述
動物毛發(fā)纖維 animal hair fibre	用于紡織的角蛋白纖維類型：羊毛、羊絨和牦牛。
液相色譜-質(zhì)譜 liquid chromatography – mass spectrometry	一種分析化學技術(shù)，結(jié)合了液相色譜的物理分離能力和質(zhì)譜的質(zhì)量分析能力。
纖維測試樣品 fibre test specimen	從實驗室樣品中隨機切割的纖維片段中取出的一部分，用于測量目的。
胰蛋白酶消化 trypsin digestion	樣品制備的一部分，用于質(zhì)譜鑒定，包括通過胰蛋白酶將蛋白質(zhì)酶切成有限數(shù)量的較短片段。
肽 peptide	酶消化后從蛋白質(zhì)中得到的短片段。
標記肽 marker peptide	用于蛋白質(zhì)鑒定、回收和純化的蛋白質(zhì)部分。
蛋白質(zhì)組分析 proteomic analysis	使用不同的分離和分析技術(shù)（如質(zhì)譜）系統(tǒng)地鑒定和量化生物系統(tǒng)完整蛋白質(zhì)組的過程。

離心機轉(zhuǎn)速范圍為200 r/min至20,000 r/min	用于分離樣品中的固體和液體部分。
Sorvall ST 40系列離心機賽默飛 Sorvall ST 40系列 Thermo Scientific? Multifuge? X4/X4R Pro 高性能通用臺式離心機賽默飛 Multifuge X4/X4R Pro 75009900/75009915 貝克曼庫爾特Avanti J-26XP系列高效離心機貝克曼庫爾特貝克曼庫爾特Avanti J-26XP系列貝克曼庫爾特Avanti J-30I高效離心機貝克曼庫爾特貝克曼庫爾特Avanti J-30I
切片機符合ISO 137	用于切割纖維片段。
美國RMC可視化超薄切片機PowerTome PCZ RMC PowerTome PCZ HistoCore NANOCUT R - 全自動輪轉(zhuǎn)式切片機徠卡 HistoCore NANOCUT R 中鏡科儀振動切片機中鏡科儀 DTK-1000/3000/PRO7 中鏡科儀組織取樣切片機MP10180 如魚 MP10180
切片機符合ISO 137	用于切割纖維片段。
冷凍切片機-CT520/6250 達科為 CT520/6250
光學顯微鏡符合ISO 17751-1	用于初步鑒定纖維形態(tài)。
恒溫水浴可控加熱，搖速范圍為20 r/min至200 r/min	用于樣品加熱和攪拌。
氮氣流樣品濃縮器最大氣體壓力為2 psi，配備鋼針	用于濃縮樣品。
渦旋混合器轉(zhuǎn)速范圍為100 r/min至3,200 r/min	用于混合樣品。
液相色譜-質(zhì)譜儀配備電噴霧離子源（LC-ESI-MS）	用于分析特定標記物。
索氏提取器	由冷凝器、提取器、圓底燒瓶和用于保留樣品的套管（通常由厚濾紙制成）組成。