實驗概要本文以鼻疽為例介紹了固相補體結合試驗(solid phase complementfixation test,SPCFT)的原理和操作流程。實驗原理原理與直接補體結合反應的原理相同,即以是否溶血為標志,間接測定補體是否被特異的抗原抗體復合物所消耗的一種血清學反應。如果不溶血稱為固相補體結合試驗陽性;發(fā)生溶血,則稱為固相補體結合試驗陰性。...
又如抗原抗體為非特異性,抗原抗體不結合,不吸附補體,補體轉向溶血系統(tǒng),應完全溶血,但由于補體過少,不能全溶,影響結果判定。故補體量必須恰如其分。溶血素量也有一定影響,例如陰性血清,應完全溶血,但溶血素量少,溶血不全,可被誤認為弱陽性。另外,這些因子的用量又與其活性有關:活性強,用量少;活性弱,用量多,故在本試驗之前,必須精確測定溶血素效價、溶血系統(tǒng)補體價、溶菌系統(tǒng)補體價等,測定其活性以確定用量。?...
如果加入的抗體與吸附在紅細胞表面的抗原不相對應,則不能激活補體,也就不能發(fā)生溶血。試驗中,可根據(jù)反應孔周圍出現(xiàn)的溶血環(huán)直徑大小,進行結果判定。主要試劑1. 鼻疽抗原、鼻疽陽性及陰性血清、凍干補體鼻疽抗原作1∶5、鼻疽陽性及陰性血清作1∶2、凍干補體作1∶3稀釋;2. 1/2萬的鞣酸液;3. 綿羊紅細胞;4. 1%瓊脂糖凝膠。實驗步驟1. ?...
在測試期間,將血清樣品與被熒光染料標記的抗原小分子孵育,在布魯氏菌屬的抗體的存在下,形成了大的熒光復合物。在陰性樣品中,抗原是未結合的狀態(tài),與布魯氏菌屬陽性樣本相比,這些較小的抗原分子旋轉得更快,因此引起光的更大去極化。...
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